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碘[¹²⁵I]睪酮

放射免疫分析藥盒說明書

【藥品名稱】

通用名：碘[¹²⁵I]睪酮放射免疫分析藥盒

英文名：Iodine[¹²⁵I] Testosterone Radioimmunoassay Kit

漢語拼音：Dian [¹²⁵I] Gaotong Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)呈疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[¹²⁵I]，其物理半衰期(T1/2)為60天。

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【意義】

睪酮（testosterone, T）是一種19碳甾體激素，分子量288D，男性主要由睪wan間隙細(xì)胞分泌，少量來自腎上腺皮質(zhì)；女性主要由腎上腺網(wǎng)狀帶分泌。睪酮是雄性激素中活性強的一種激素，其主要生理作用系維持男性第二性征和正常性腺功能，以及促進蛋白質(zhì)合成代謝等。

本藥盒主要用于血清中睪酮含量的測定，對男性性早熟、男性性功能低下、陽萎、睪wan發(fā)育不全、睪wan細(xì)胞瘤、女性特發(fā)性多毛癥以及Cushing氏綜合征等內(nèi)分泌疾病的診斷均有重要意義。

血清T增高常見于：睪wan良性間質(zhì)細(xì)胞瘤、先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥、真性性早熟癥、皮質(zhì)醇增多癥、女性男性化腫瘤、女性特發(fā)性多毛癥、多囊卵巢綜合癥、注射睪酮或促性腺激素、肥胖以及中晚期孕婦等。

血清T降低常見于：男性性功能低下、原發(fā)性睪wan發(fā)育不全性幼稚、垂體功能減退、系統(tǒng)性紅斑狼瘡（陽性率約50%）、陽萎、骨質(zhì)疏松癥、垂體性矮小癥、甲狀腺功能減低、高PRL血癥、部分男性乳房發(fā)育、外傷后性功能減退、隱睪炎等。

【測定原理】

本藥盒采用競爭放射免疫分析法，即標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中的T和¹²⁵I-T共同與*的特異性睪酮抗體在適宜的條件下進行競爭性結(jié)合反應(yīng)。一部分¹²⁵I-T與抗體結(jié)合形成復(fù)合物，而另一部分呈游離狀態(tài)。¹²⁵I-T與抗體結(jié)合的比例取決于標(biāo)準(zhǔn)或待測樣品中非標(biāo)記T的含量，非標(biāo)記T的含量越高，¹²⁵I-T與抗體形成復(fù)合物越少；非標(biāo)記T的含量越低，¹²⁵I-T與抗體形成復(fù)合物越多?？乖?抗體復(fù)合物用免疫分離劑沉淀下來，測定沉淀物的放射性計數(shù)。經(jīng)過適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出被測樣品的睪酮含量（數(shù)據(jù)可由計算機自動處理）。

【適用儀器】適用于各類ν-放射免疫分析儀。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清，待測；如不立即測量，可將樣品密封后，置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y，2~8℃保存不應(yīng)超過1周，-20℃保存不超過2個月。冰凍樣品在保存過程中應(yīng)避免反復(fù)凍融。冰凍樣品測定前，將樣品置于室溫或常溫水中融化，并充分搖勻!

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

.1 T標(biāo)準(zhǔn)品：淡黃色液體，直接使用。濃度依次為：0、0.1、0.5、2、8、20ng/ml，2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定；-20℃冷凍保存，標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定，應(yīng)避免反復(fù)凍融。

• ¹²⁵I-T：紅色液體，直接使用。含1~3μCi  ¹²⁵I標(biāo)記的19位睪酮衍生物，2~8℃保存，標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 兔抗-T抗體：藍(lán)色液體，直接使用。2~8℃保存，標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定；開封后42天穩(wěn)定。
• 驢抗兔免疫分離劑：液體，加樣前充分搖勻。2~8℃保存標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后45天內(nèi)穩(wěn)定。
• T質(zhì)控血清：淡黃色液體，直接使用。2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定，―20℃冷凍保存標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定，應(yīng)避免反復(fù)凍融。附值見質(zhì)控血清使用說明書。

2測定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S₀-S₅和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑?。┌ù郎y樣品要搖勻，并且平衡到室溫。

加樣順序表：                            單位：μl

3數(shù)據(jù)處理

• 聯(lián)機處理: 由電腦自動處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
• 手工作圖或計算器處理:
  •  百分結(jié)合率計算：設(shè)S₀管計數(shù)為B₀，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計數(shù)為B，非特異管計數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計算公式為B/ B₀=(B－NSB)/( B₀－NSB)×

3.2.2 logit計算：各標(biāo)準(zhǔn)點或樣品管的logit值計算公式為logit=ln[(B/ B₀)/(1－B/ B₀)]

3.2.3 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的B/B₀為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時是一條直線）。根據(jù)待測樣品的B/B₀可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

3.3 尿液中睪酮的測定方法及數(shù)據(jù)處理

3.3.1收集24小時尿，量總體積，混勻后取尿液0.2ml，加 0.25N鹽酸0.8ml，于30℃水浴水解20~24小時，以此水解尿作為測定樣品。

3.3.2取水解尿樣品25μl，加到樣品管中，用緩沖液（此緩沖液為睪酮水解尿）補到50ul即加25ul測尿緩沖液。該緩沖液為0.24M Triss溶液，其作用是將強酸性的水解尿樣品調(diào)整為接近中性，否則會使測定值嚴(yán)重失真（偏高）！，

3.3.3 24小時睪酮尿含量的計算：

尿液濃度= A·V₁/V₂·50/V₃ ng/ml=10A ng/ml

24小時尿中睪酮總量=A·V₁/V₂·50/V₃·Dng=0.01A·Dμg

其中： A—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得睪酮的濃度（ng/ml）

V_1——水解尿的總體積（1ml）

V_2——被水解的尿體積（0.2ml）

V_3——水解尿加入的體積（25μl）

50為加入測量管中水解尿與緩沖液的總體積

D—24小時總尿量（ml）

    例如：某正常人24小時總尿量為2000ml，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出濃度為3.8ng/ml，則：

尿液濃度=10×3.8ng/ml=38ng/ml。

24小時尿中睪酮總量=0.01×3.8×2000μg =78μg。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實際計算）。濃度單位ng/ml

【參考正常值】

下列所提供的數(shù)據(jù)僅供參考，每個實驗室都應(yīng)根據(jù)本實驗室的條件及接觸的人群建立自己實驗室睪酮的正常值范圍。

1．人血清睪酮參考正常值：                  （單位：ng/ml）

• 尿液中睪酮參考正常值：

      成年男性：47~117μg/24小時尿；

      成年女性：0.5~12μg/24小時尿。

• 唾液中睪酮參考正常值：　

成年男性：0.15~0.25ng/ml；

成年女性：卵泡期0.08~0.13ng/ml，排卵期0.24~32ng/ml，黃體期0.11~0.15ng/ml。

單位換算：1 ng/ml =100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=3.46nmol/l

由于地區(qū)及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

• 測定范圍：0.1~20ng/ml；
• 靈敏度：0.02ng/ml；
• 精密度：批內(nèi)變異CV<10%；批間變異CV<15%。
• 特異性：19位睪酮抗體與下列睪酮類似物的交叉反應(yīng)率如下：

       雙氫睪酮     1.1×10^-2%        雌二醇     2.1×10^-2%

     雌 三 醇     2×10^-15%         孕  酮     3.2×10^-2%

     雄烯二酮     1.2×10^-5%

5．使用期限：見產(chǎn)品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項】

• 收到試劑盒后，盡快存放在2~8℃。
• 使用前請詳細(xì)閱讀此說明書。
• 當(dāng)樣品中睪酮濃度高于20ng/ml時，可將樣品用“0”標(biāo)準(zhǔn)或較低含量的女性血清稀釋5~10倍后復(fù)測，測定濃度乘以稀釋倍數(shù)即為樣品濃度。
• 不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
• 吸棄上清液時，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測定結(jié)果。
• 藥盒請在有效期內(nèi)使用。
• 標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請按傳染病實驗室規(guī)程操作。
• 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護，放射性廢棄物須按放射防護條例規(guī)定處理。
• 使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。

【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用，孕婦及哺乳期婦女不需接觸本品，所以對其健康無損害。
【兒童用藥】由于本品僅供體外診斷用，兒童不需接觸本品，所以對其健康無損害。

【貯藏】2～8℃保存。

【有效期】1個月。

【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》，國家藥典委員會  編 2005年5月，WS1-(R-41)-2004Z。

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